β Amyloid 1-42 Antibody [H15J22]

目錄號(hào): F3375

抗體應(yīng)用：反應(yīng)性：Mouse, Rat, Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human brain tissue with F3375 at 1:1000 dilution.

規(guī)格	價(jià)格	庫存
20uL	790	現(xiàn)貨
50uL	1240	現(xiàn)貨
100uL	1990	現(xiàn)貨
100uL*2	3790	現(xiàn)貨
400-668-6834 [email protected]

使用信息

稀釋比例
IHC1:1000

抗體應(yīng)用
IHC

反應(yīng)性
Mouse, Rat, Human

抗體類型
Rabbit Monoclonal Antibody

儲(chǔ)存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

儲(chǔ)存條件(自收到貨起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

陽性對照	Human alzheimer brain
陰性對照

實(shí)驗(yàn)方法

IHC
實(shí)驗(yàn)步驟：脫蠟/補(bǔ)液 1. 脫蠟/水合切片： 2. 將切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分鐘。 3. 將切片在 100% 乙醇中孵育兩次，每次 10 分鐘。 4. 將切片在 95% 乙醇洗滌液中孵育兩次，每次 10 分鐘。 5. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 6.抗原修復(fù)：對于檸檬酸鹽：將載玻片浸入 1X 檸檬酸鹽暴露溶液中，在微波爐中加熱，直至開始沸騰；在亞沸溫度 (95°-98°C) 下繼續(xù)煮 10 分鐘。在工作臺(tái)上冷卻玻片 30 分鐘。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分鐘。 2. 將切片在 3% 過氧化氫中孵育 10 分鐘。 3. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 4. 在洗滌緩沖液中洗滌切片 5 分鐘。 5. 用 100–400 µl 封閉液在室溫下封閉每個(gè)切片 1 小時(shí)。 6. 除去封閉液，并向每個(gè)切片中添加 100–400 µl 一抗稀釋液。 4°C 孵育過夜。 7. 去除抗體溶液，用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆蓋切片。在加濕室中室溫孵育 30 分鐘。 9. 用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。 10. 使用前將 DAB 顯色劑濃縮液加入 DAB 稀釋液中并充分混合。 11. 在每個(gè)切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切監(jiān)測。 1-10 分鐘通常可提供可接受的染色強(qiáng)度。 12. 將載玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用蘇木精復(fù)染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 15. 切片脫水：95%乙醇孵育切片兩次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒；在二甲苯中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒。 16. 用蓋玻片和封固劑封固切片。

IHC

實(shí)驗(yàn)步驟：

脫蠟/補(bǔ)液

1. 脫蠟/水合切片：

2. 將切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分鐘。

3. 將切片在 100% 乙醇中孵育兩次，每次 10 分鐘。

4. 將切片在 95% 乙醇洗滌液中孵育兩次，每次 10 分鐘。

5. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

6.抗原修復(fù)：對于檸檬酸鹽：將載玻片浸入 1X 檸檬酸鹽暴露溶液中，在微波爐中加熱，直至開始沸騰；在亞沸溫度 (95°-98°C) 下繼續(xù)煮 10 分鐘。在工作臺(tái)上冷卻玻片 30 分鐘。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分鐘。

2. 將切片在 3% 過氧化氫中孵育 10 分鐘。

3. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

4. 在洗滌緩沖液中洗滌切片 5 分鐘。

5. 用 100–400 µl 封閉液在室溫下封閉每個(gè)切片 1 小時(shí)。

6. 除去封閉液，并向每個(gè)切片中添加 100–400 µl 一抗稀釋液。 4°C 孵育過夜。

7. 去除抗體溶液，用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆蓋切片。在加濕室中室溫孵育 30 分鐘。

9. 用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。

10. 使用前將 DAB 顯色劑濃縮液加入 DAB 稀釋液中并充分混合。

11. 在每個(gè)切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切監(jiān)測。 1-10 分鐘通常可提供可接受的染色強(qiáng)度。

12. 將載玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用蘇木精復(fù)染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

15. 切片脫水：95%乙醇孵育切片兩次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒；在二甲苯中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒。

16. 用蓋玻片和封固劑封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特異性
β Amyloid 1-42 Antibody [H15J22] 可檢測內(nèi)源性 β Amyloid 1-42 總蛋白水平。

蛋白定位
淀粉樣蛋白，細(xì)胞膜，細(xì)胞突起，包被小窩，細(xì)胞質(zhì)，胞質(zhì)囊泡，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，內(nèi)體，高爾基體

Uniprot ID
P05067

克隆號(hào)
H15J22

別名
A4, AD1, APP, Amyloid-beta precursor protein, ABPP, APPI, Alzheimer disease amyloid A4 protein homolog, Alzheimer disease amyloid protein, Amyloid precursor protein, Amyloid-beta (A4) precursor protein, Amyloid-beta A4 protein, Cerebral vascular amyloid peptide, PreA4, Protease nexin-II, CVAP, PN-II

背景
淀粉樣蛋白β1-42 (Aβ42) 是由淀粉樣蛋白前體 (APP) 在神經(jīng)元中經(jīng)β-分泌酶和γ-分泌酶依次裂解而生成的42個(gè)氨基酸肽。結(jié)構(gòu)上，Aβ42的C端高度疏水性，促使其構(gòu)象從α-螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)棣?折疊，從而有利于其聚集形成可溶性低聚物、原纖維和不溶性淀粉樣蛋白纖維。Aβ42主要在腦部表達(dá)，尤其是在大腦皮層，與較短的Aβ40相比，Aβ42更容易聚集且具有神經(jīng)毒性。功能上，Aβ42的病理性積聚（尤其是以可溶性低聚物形式）與阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，因?yàn)樗鼤?huì)破壞突觸信號(hào)傳導(dǎo)、損害記憶力并促進(jìn)斑塊形成。

背景

淀粉樣蛋白β1-42 (Aβ42) 是由淀粉樣蛋白前體 (APP) 在神經(jīng)元中經(jīng)β-分泌酶和γ-分泌酶依次裂解而生成的42個(gè)氨基酸肽。結(jié)構(gòu)上，Aβ42的C端高度疏水性，促使其構(gòu)象從α-螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)棣?折疊，從而有利于其聚集形成可溶性低聚物、原纖維和不溶性淀粉樣蛋白纖維。Aβ42主要在腦部表達(dá)，尤其是在大腦皮層，與較短的Aβ40相比，Aβ42更容易聚集且具有神經(jīng)毒性。功能上，Aβ42的病理性積聚（尤其是以可溶性低聚物形式）與阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，因?yàn)樗鼤?huì)破壞突觸信號(hào)傳導(dǎo)、損害記憶力并促進(jìn)斑塊形成。

參考文獻(xiàn)
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28713158/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23406382/

PVDF膜孔徑規(guī)格選擇參照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填項(xiàng)

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%