Protein A/G免疫沉淀磁珠

僅限科研使用

Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“納米表面生物技術(shù)(S-TEC)，Protein A/G包被在超順磁性磁珠微球表面，包被密度高達(dá)9.3×10¹³個分子/平方厘米。與同類產(chǎn)品相比，Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗體結(jié)合位點(diǎn)。該磁珠可用于蛋白質(zhì)免疫共沉淀。

產(chǎn)品優(yōu)勢

省時：比親和凝膠法節(jié)省大約80min（以IP實(shí)驗(yàn)為例比較）；

操作簡單：磁性分離，無需離心；

非特異低：親和凝膠孔徑大，容易產(chǎn)生非特異吸附，而磁珠孔徑小，不容易產(chǎn)生非特異吸附；

結(jié)合量高：磁珠表面PorteinA/G的蛋白包被量高達(dá)9.3×10¹³個分子/平方厘米，抗體加載量為0.4-0.5 mg/mL磁珠懸液。

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價格對比

產(chǎn)品描述

Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“納米表面生物技術(shù)”(S-TEC)，Protein A/G包被在超順磁性磁珠微球表面，包被密度高達(dá)9.3×10¹³個分子/平方厘米。與同類產(chǎn)品相比，Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗體結(jié)合位點(diǎn)。在Co-IP實(shí)驗(yàn)中，只需使用更少的磁珠量，非特異性結(jié)合低，使用簡便有效。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠具有大面積特異的表面區(qū)域，從而大大縮短抗體吸附和抗原結(jié)合的時間。最短時，抗原和抗體的結(jié)合時間只需10分鐘，可以在30分鐘內(nèi)完成完整的Co-IP實(shí)驗(yàn)。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠適用的范圍廣泛，例如細(xì)胞裂解液、細(xì)胞分泌液上清、血清、動物腹水以及其它的免疫抗原等。

特性

Protein A/G磁珠是將Protein A重組蛋白和Protein G重組蛋白分別偶聯(lián)到磁珠表面制備而成的親和純化磁珠。其中，Protein A含有四個IgG的Fc結(jié)合區(qū)域，而Protein G含有兩個IgG的Fc結(jié)合區(qū)域。Protein A/G磁珠結(jié)合了Protein A和Protein G的優(yōu)點(diǎn)，能夠高效捕獲和純化a廣泛種屬和亞類的IgG抗體。與單獨(dú)使用Protein A或Protein G相比，Protein A/G磁珠的IgG結(jié)合能力更強(qiáng)，且結(jié)合過程受pH值影響更小。

產(chǎn)品性質(zhì)

濃度	10 mg/mL
磁珠大小	100 nm
人IgG結(jié)合能力	0.4-0.5 mg/mL
配體	重組蛋白A/G
應(yīng)用	Protein純化，免疫沉淀
pH穩(wěn)定性	6-8 （長期）
運(yùn)輸條件	4°C冰袋

儲存條件(自收到貨起)

4°C可以儲存2年。在缺乏甘油的情況下避免反復(fù)凍融。

實(shí)驗(yàn)方法

圖1展示了免疫共沉淀（Co-IP）的操作方法。可以根據(jù)抗體類型和靶蛋白進(jìn)行進(jìn)一步的優(yōu)化。Protein A/G免疫磁珠是進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn)的最佳方案。

表1 免疫共沉淀（IP）的操作方法

表2. 推薦的緩沖液配方
緩沖液	推薦配方（自備）
Binding buffer	50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent (TritonX-100, Tween 20 or NP40), pH 7.5
Wash buffer	50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent, pH 7.5
Elution buffer	0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1 (or 0.1 M citric acid, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1)
Neutralize buffer	1M Tris, pH8.0

實(shí)驗(yàn)之前的注意事項(xiàng)

1 進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn)之前，請仔細(xì)閱讀操作說明；
2 該產(chǎn)品需要使用磁力架
3 使用之前，請將Protein A/G免疫磁珠混勻；
4 Protein A/G免疫磁珠應(yīng)該保持在儲存液中避免干掉；
5 Protein A/G免疫磁珠應(yīng)避免凍融或離心；
6 為保證最佳結(jié)果，請選擇特異性好的抗體；
7 根據(jù)不同的抗體和抗原僅進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)化；

表1. 抗體與Protein A/G及Protein A的結(jié)合能力比較
Species	Antibody class	sProtein A/G	sProtein A
Human	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
	IgG1, IgG2	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
	IgG3	＋＋＋＋＋	＋
	IgG4	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
	IgM	＋	＋
	IgD	－	－
	IgA	＋	＋
	IgA1, IgA2	＋	＋
	IgE	＋＋＋	＋＋＋
	Fab	＋	＋
	ScFv	＋	＋
Mouse	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
	IgM	－	－
	IgG1	＋＋＋	＋
	IgG2a	＋＋＋	＋＋＋
	IgG2b	＋＋＋	＋＋＋
	IgG3	＋＋＋	＋＋＋＋＋
Rat	Total IgG	＋＋＋	＋
	IgG 1	＋＋＋	＋＋＋
	IgG2a	＋＋＋＋＋	＋＋＋
	IgG2b	＋	＋＋＋
	IgG2c	＋＋＋＋＋	＋＋＋
Cow	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋
	IgG1	＋＋＋＋＋	＋
	IgG2	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Goat	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋
	IgG1	＋＋＋＋＋	＋
	IgG2	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Sheep	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋
	IgG1	＋＋＋＋＋	＋
	IgG2	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Horse	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋
	IgG(ab), IgG(c)	＋	－
	IgG(T)	＋＋＋＋＋	＋
Rabbit	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Guinea pig	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Hamster	Total IgG	＋＋＋	＋＋＋
Pig	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Donkey	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋
Cat	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Dog	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Monkey	Total IgG	＋＋＋＋＋	＋＋＋＋＋
Chicken	Total IgG	－	－

Notes: "+"= weak binding, "+++"=medium binding, "+++++"=strong binding, "-"=no binding

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