MCP1 Antibody [M3B19]

目錄號: F3225

本抗體需使用抗大鼠二抗。

抗體應(yīng)用：反應(yīng)性：Mouse

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse testicles tissue with F3225 at 1:10 dilution.

規(guī)格	價格	庫存
20uL	790	現(xiàn)貨
50uL	1240	現(xiàn)貨
100uL	1990	現(xiàn)貨
100uL*2	3790	現(xiàn)貨
400-668-6834 [email protected]

操作要點

本抗體需使用抗大鼠二抗。

使用信息

稀釋比例

抗體應(yīng)用
IHC

反應(yīng)性
Mouse

抗體類型
Rat Monoclonal Antibody

儲存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

儲存條件(自收到貨起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

預(yù)測分子量
11 kDa

陽性對照	Mouse testis
陰性對照

實驗方法

IHC
實驗步驟：脫蠟/補液 1. 脫蠟/水合切片： 2. 將切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分鐘。 3. 將切片在 100% 乙醇中孵育兩次，每次 10 分鐘。 4. 將切片在 95% 乙醇洗滌液中孵育兩次，每次 10 分鐘。 5. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 6.抗原修復(fù)：對于檸檬酸鹽：將載玻片浸入 1X 檸檬酸鹽暴露溶液中，在微波爐中加熱，直至開始沸騰；在亞沸溫度 (95°-98°C) 下繼續(xù)煮 10 分鐘。在工作臺上冷卻玻片 30 分鐘。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分鐘。 2. 將切片在 3% 過氧化氫中孵育 10 分鐘。 3. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 4. 在洗滌緩沖液中洗滌切片 5 分鐘。 5. 用 100–400 µl 封閉液在室溫下封閉每個切片 1 小時。 6. 除去封閉液，并向每個切片中添加 100–400 µl 一抗稀釋液。 4°C 孵育過夜。 7. 去除抗體溶液，用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆蓋切片。在加濕室中室溫孵育 30 分鐘。 9. 用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。 10. 使用前將 DAB 顯色劑濃縮液加入 DAB 稀釋液中并充分混合。 11. 在每個切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切監(jiān)測。 1-10 分鐘通常可提供可接受的染色強度。 12. 將載玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用蘇木精復(fù)染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。 15. 切片脫水：95%乙醇孵育切片兩次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒；在二甲苯中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒。 16. 用蓋玻片和封固劑封固切片。

IHC

實驗步驟：

脫蠟/補液

1. 脫蠟/水合切片：

2. 將切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分鐘。

3. 將切片在 100% 乙醇中孵育兩次，每次 10 分鐘。

4. 將切片在 95% 乙醇洗滌液中孵育兩次，每次 10 分鐘。

5. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

6.抗原修復(fù)：對于檸檬酸鹽：將載玻片浸入 1X 檸檬酸鹽暴露溶液中，在微波爐中加熱，直至開始沸騰；在亞沸溫度 (95°-98°C) 下繼續(xù)煮 10 分鐘。在工作臺上冷卻玻片 30 分鐘。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分鐘。

2. 將切片在 3% 過氧化氫中孵育 10 分鐘。

3. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

4. 在洗滌緩沖液中洗滌切片 5 分鐘。

5. 用 100–400 µl 封閉液在室溫下封閉每個切片 1 小時。

6. 除去封閉液，并向每個切片中添加 100–400 µl 一抗稀釋液。 4°C 孵育過夜。

7. 去除抗體溶液，用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆蓋切片。在加濕室中室溫孵育 30 分鐘。

9. 用洗滌緩沖液洗滌切片 3 次，每次 5 分鐘。

10. 使用前將 DAB 顯色劑濃縮液加入 DAB 稀釋液中并充分混合。

11. 在每個切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切監(jiān)測。 1-10 分鐘通常可提供可接受的染色強度。

12. 將載玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用蘇木精復(fù)染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片兩次，每次 5 分鐘。

15. 切片脫水：95%乙醇孵育切片兩次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒；在二甲苯中重復(fù)，孵育切片兩次，每次 10 秒。

16. 用蓋玻片和封固劑封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特異性
MCP1 Antibody [M3B19] 可檢測內(nèi)源性 MCP1 總蛋白水平。

蛋白定位
細胞外環(huán)境

Uniprot ID
P10148

克隆號
M3B19

別名
Je, Mcp1, Scya2, Ccl2, C-C motif chemokine 2, Monocyte chemoattractant protein 1, Monocyte chemotactic protein 1, Platelet-derived growth factor-inducible protein JE, Small-inducible cytokine A2, MCP-1

背景
單核細胞趨化蛋白-1 (MCP-1/CCL2) 是CC趨化因子家族的成員，是單核細胞的強效趨化因子。它被認為與JE基因相同，JE基因最初在小鼠成纖維細胞中被鑒定，并由血小板衍生的生長因子誘導(dǎo)。人類MCP-1基因位于17q11.2染色體上，編碼一個由76個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，分子量約為13 kDa。MCP-1屬于趨化因子亞家族，該亞家族至少包含四個成員：MCP-1、MCP-2、MCP-3和MCP-4。CCL2由多種細胞類型產(chǎn)生，這些細胞類型既可以組成性產(chǎn)生，也可以響應(yīng)氧化應(yīng)激、細胞因子和生長因子等刺激而產(chǎn)生。其來源包括內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、上皮細胞、平滑肌細胞、系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞、單核細胞和小膠質(zhì)細胞——這些細胞類型在循環(huán)系統(tǒng)和組織中的抗病毒免疫防御中發(fā)揮著重要作用。功能上，CCL2 指導(dǎo)單核細胞、記憶 T 細胞和自然殺傷 (NK) 細胞的遷移和浸潤。CCL2 的生物學(xué)效應(yīng)由其受體 CCR2 介導(dǎo)，CCR2 的表達與 CCL2 相比更為受限。CCR2 有兩種剪接異構(gòu)體：CCR2A 和 CCR2B，它們僅在 C 末端區(qū)域有所不同。

背景

單核細胞趨化蛋白-1 (MCP-1/CCL2) 是CC趨化因子家族的成員，是單核細胞的強效趨化因子。它被認為與JE基因相同，JE基因最初在小鼠成纖維細胞中被鑒定，并由血小板衍生的生長因子誘導(dǎo)。人類MCP-1基因位于17q11.2染色體上，編碼一個由76個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，分子量約為13 kDa。MCP-1屬于趨化因子亞家族，該亞家族至少包含四個成員：MCP-1、MCP-2、MCP-3和MCP-4。CCL2由多種細胞類型產(chǎn)生，這些細胞類型既可以組成性產(chǎn)生，也可以響應(yīng)氧化應(yīng)激、細胞因子和生長因子等刺激而產(chǎn)生。其來源包括內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、上皮細胞、平滑肌細胞、系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞、單核細胞和小膠質(zhì)細胞——這些細胞類型在循環(huán)系統(tǒng)和組織中的抗病毒免疫防御中發(fā)揮著重要作用。功能上，CCL2 指導(dǎo)單核細胞、記憶 T 細胞和自然殺傷 (NK) 細胞的遷移和浸潤。CCL2 的生物學(xué)效應(yīng)由其受體 CCR2 介導(dǎo)，CCR2 的表達與 CCL2 相比更為受限。CCR2 有兩種剪接異構(gòu)體：CCR2A 和 CCR2B，它們僅在 C 末端區(qū)域有所不同。

參考文獻
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19441883/

PVDF膜孔徑規(guī)格選擇參照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

技術(shù)支持

在訂購、運輸、儲存和使用我們的產(chǎn)品的任何階段，您遇到的任何問題，均可以通過撥打我們的熱線電話400-668-6834，或者技術(shù)支持郵箱[email protected]，直接聯(lián)系到我們。我們會在24小時內(nèi)盡快聯(lián)系您。

* 必填項

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%