Danoprevir

別名: ITMN-191, RG7227 中文名稱：丹諾瑞韋

目錄號：S1183 Purity: 99.94%

Danoprevir 是一種肽類抑制劑，作用于丙型肝炎病毒(HCV)的NS3/4A蛋白酶，IC50為0.2-3.5 nM，抑制HCV 1A/1B/4/5/6基因型比抑制2B/3A基因型效果高10倍左右。Phase 2。

Danoprevir Chemical Structure

CAS: 850876-88-9

規(guī)格	價格	庫存
10mM (1mL in DMSO)	2470	現(xiàn)貨
2mg	991.61	現(xiàn)貨
5mg	1729.41	現(xiàn)貨
10mg	3005.73	現(xiàn)貨
50mg	10401.3	現(xiàn)貨
200mg	19700	現(xiàn)貨
更大包裝有超大折扣
400-668-6834 [email protected]

產(chǎn)品質(zhì)控

批次： S118301 DMSO]144 mg/mL]false]Ethanol]144 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 純度： 99.94%

99.94

Danoprevir相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)產(chǎn)品	Lomibuvir (VX-222) Asunaprevir PSI-6206 (GS-331007)	點擊展開
相關(guān)化合物庫	FDA藥物庫天然產(chǎn)物庫已知活性藥物庫-I 蛋白酶抑制劑庫泛素化化合物庫	點擊展開

生物活性

產(chǎn)品描述

特性

Danoprevir丙型肝炎病毒(HCV)的NS3/4A蛋白酶的模擬抑制劑。

靶點

HCV NS3/4A protease ^[1]

0.2 nM-3.5 nM

體外研究(In Vitro)
體外研究活性	0.29 nM Danoprevir抑制NS3/4A 蛋白酶, 而10 μM Danoprevir 卻不能抑制一組79種蛋白酶，離子通道，轉(zhuǎn)運蛋白，及細(xì)胞表面受體。Danoprevir與 NS3/4A第一次結(jié)合能維持5小時以上，且保持抑制作用狀態(tài)。Danoprevir (45 nM) 消除病人肝細(xì)胞衍生的Huh7細(xì)胞衍生的HCV基因型1b復(fù)制子，EC50為1.8 nM。^[1]含個體突變的HCV 亞基因組復(fù)制子細(xì)胞系, V36M, R109K, 和V170A 替換不會抗Danoprevir,但是R155K替換則高度抗 Danoprevir。^[2] Danoprevir 作用于轉(zhuǎn)染重組病毒的Huh7.5細(xì)胞, 顯示出抗病原體抑制效果，作用于HCV基因型 1, 4,和 6時，IC50為2-3 nM, 比作用于基因型2/3/5 (280-750 nM)低100倍以上。^[3]
激酶實驗	持續(xù)熒光反應(yīng)能量轉(zhuǎn)移(FRET)實驗
激酶實驗	實驗buffer含25 μM NS4A肽, 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15% (vol/vol)甘油, 0.6 mM月桂基二甲基氨基氧化物, 10 mM二硫蘇糖醇, 及0.5 μM 熒光素/QXL520標(biāo)簽的FRET底物{Ac-DE-Dap(QXL520)-EE-Abu-ψ-[COO]-AS-Cys(5-FAMsp)-NH2}. 加入50 pM K2040 酶開始反應(yīng)。反應(yīng)在96孔板上黑暗中進(jìn)行，收集熒光數(shù)據(jù)。對照組沒有抑制劑，有酶參與。分析反應(yīng)的線性相位計算起始反應(yīng)率，從而獲得IC50值。10 nM NS3/4A 和兩倍量Danoprevir 在1×實驗buffer中預(yù)溫育15分鐘形成Danoprevir-NS3/4A復(fù)合體測定活性。隨后，快速稀釋復(fù)合體，稀釋200倍，加到含底物的實驗buffer中。對照組條件相同，但是NS3/4A和Danoprevir沒有預(yù)溫育，酶加入復(fù)合體反應(yīng)混合物中，開始反應(yīng)。此外，對照組沒有或NS3。反應(yīng)進(jìn)行超過5小時。
細(xì)胞實驗	細(xì)胞系	攜帶HCV復(fù)制子的Huh7細(xì)胞
	濃度	5 pM 到100 nM
	孵育時間	48小時
	方法	進(jìn)行抗病原體的實驗，接種細(xì)胞，梯度稀釋的Danoprevir加到含K2040復(fù)制子的Huh7細(xì)胞中。溫育48小時后，提取細(xì)胞內(nèi) RNA,通過RT-PCR，使用引物 (5’-CACTCCCCTGTGAGGAACTACTG-3’ 和5’-AGGCTGCACGACACTCATACT-3’) 和HCV 5非翻譯區(qū)的特定探針(5’-6-FAM-CTTCACGCAGAAAGCGTCTAGCCATGG-MGBNFQ-3’, FAM為6-羧基熒光素，MGBNFQ為分子槽溝，結(jié)合到非熒光猝火器上) ，且使用ABI Prism 7900 序列檢測器系統(tǒng)測定HCV復(fù)制子RNA水平。使用TaqMan Gold RT-PCR 試劑進(jìn)行單管反應(yīng)。RNA 規(guī)格和樣本的三次重復(fù)反應(yīng)在50 μL含 5 μL細(xì)胞內(nèi) RNA (50 ng)的buffer中進(jìn)行。RT在48^oC下進(jìn)行30分鐘，隨后在95^oC下進(jìn)行10分子。PCR反應(yīng)流程如下， 95^oC下進(jìn)行15秒， 60^oC下進(jìn)行1分鐘，循環(huán)40次。測定每個RNA濃度，做三次平行。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定復(fù)制子RNA的絕對濃度。根據(jù)復(fù)制子水平測定EC50值。

體內(nèi)研究(In Vivo)
體內(nèi)研究活性	Danoprevir按30 mg/kg劑量處理鼠或猴12小時，使肝臟濃度下降，然后提高Danoprevir濃度，從細(xì)胞中消除復(fù)制子。^[1]
動物實驗	Animal Models	Sprague-Dawley鼠, 食蟹猴
	Dosages	30 mg/kg
	Administration	口服飼喂

NCT Number	Recruitment	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
臨床試驗信息 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2024-05-22)
NCT01714154	Completed	Healthy Volunteer	Hoffmann-La Roche	November 2012	Phase 1
NCT01592318	Completed	Healthy Volunteer	Hoffmann-La Roche	May 2012	Phase 1
NCT01588002	Completed	Healthy Volunteer	Hoffmann-La Roche	April 2012	Phase 1
NCT01519336	Completed	Healthy Volunteer	Hoffmann-La Roche	February 2012	Phase 1

參考文獻(xiàn)
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18824605/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18637752/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21480315/

參考文獻(xiàn)

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18824605/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18637752/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21480315/

化學(xué)信息&溶解度

分子量	731.83	分子式	C₃₅H₄₆FN₅O₉S
CAS號	850876-88-9	SDF	Download Danoprevir SDF
Smiles	CC(C)(C)OC(=O)NC1CCCCCC=CC2CC2(NC(=O)C3CC(CN3C1=O)OC(=O)N4CC5=C(C4)C(=CC=C5)F)C(=O)NS(=O)(=O)C6CC6
儲存條件(自收到貨起)	3年-20°C粉狀	儲備液保存和期限建議分裝儲備液，避免反復(fù)凍融！	1年-80°C溶于溶劑
儲存條件(自收到貨起)	3年-20°C粉狀	儲備液保存和期限建議分裝儲備液，避免反復(fù)凍融！	1個月-20°C溶于溶劑

體外溶解度
批次：

DMSO : 144 mg/mL ( (196.76 mM) ；DMSO吸濕會降低化合物溶解度，請使用新開封DMSO)

Ethanol : 144 mg/mL (196.76 mM)

Water : Insoluble

摩爾濃度計算器

體內(nèi)溶解配方批次：現(xiàn)配現(xiàn)用，請按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑				動物體內(nèi)配方計算器
均勻懸濁液	CMC-NA	≥5mg/ml	以 1 mL 工作液為例，取 5 mg該產(chǎn)品加到 1 ml CMC-NA 溶液中，混合均勻，即可得工作液濃度為 5 mg/ml的均勻懸濁液。
澄清溶液	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O 該配方已經(jīng)過Selleck實驗室實測。如果上述溶解方案不能滿足您的需求，可聯(lián)系Selleck銷售提供定制化測試。	3.600mg/ml (4.92mM)	以 1 mL 工作液為例,取50μL72mg/ml的澄清DMSO儲備液加到400μLPEG300中,混合均勻使其澄清;向上述體系中加入50μLTween80,混合均勻使其澄清;然后繼續(xù)加入500μLddH2O定容至1mL。工作液請現(xiàn)配現(xiàn)用!
澄清溶液	5% DMSO 1 95% Corn oil 該配方已經(jīng)過Selleck實驗室實測。如果上述溶解方案不能滿足您的需求，可聯(lián)系Selleck銷售提供定制化測試。	1.210mg/ml (1.65mM)	以1 mL工作液為例，取50μL 24.2mg/ml的澄清DMSO儲備液加到950μL玉米油中，混合均勻。工作液請現(xiàn)配現(xiàn)用！

實驗計算

摩爾濃度計算器

質(zhì)量	濃度	體積	分子量
=	×	×

稀釋計算器分子量計算器

動物體內(nèi)配方計算器（澄清溶液）

第一步：請輸入基本實驗信息（考慮到實驗過程中的損耗，建議多配一只動物的藥量）

給藥劑量 mg/kg 動物平均體重 g 每只動物給藥體積 μL 動物數(shù)量只

第二步：請輸入動物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH2O

%DMSO+ %

計算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH₂O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

技術(shù)支持

在訂購、運輸、儲存和使用我們的產(chǎn)品的任何階段，您遇到的任何問題，均可以通過撥打我們的熱線電話400-668-6834，或者技術(shù)支持郵箱[email protected]，直接聯(lián)系到我們。我們會在24小時內(nèi)盡快聯(lián)系您。

操作手冊

如果有其他問題，請給我們留言。

* 必填項

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):